Lonza Nucleofector 2b單孔細胞核轉染系統
——原代細胞、難轉染細胞系高效轉染解決方案
北京澤平代理的德國進(jìn)口Lonza Nucleofector 2b單孔細胞核轉染系統(原Amaxa Nucleofector II/2b Device,又稱(chēng)Lonza 2b細胞核轉儀、Lonza 2b細胞電轉儀), 作為全球知名的高效基因電轉儀,其利用傳統電穿孔原理,結合細胞特異性電轉染液,可以將包括DNA、RNA、質(zhì)粒、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核蛋白復合體RNP、小分子化合物等轉入細胞質(zhì)中,并穿過(guò)核膜直接進(jìn)入細胞核中,實(shí)現高效轉染,稱(chēng)為Nucleofector核轉染技術(shù)(Nucleofection)。其中質(zhì)粒DNA轉染效率最高達到90%、寡核苷酸如siRNA轉染效率最高達到99%。

Lonza 2b電轉儀自2001年上市以來(lái),廣泛用于包括干細胞、神經(jīng)細胞、T淋巴細胞在內的動(dòng)物原代細胞和難轉染的細胞系,以及細菌、外泌體轉染中,助力CAR-T、CAR-NK、CRISPR/Cas9基因編輯、IPS重編程、RNA干擾、外泌體遞送等多種前沿研究,全球發(fā)表文章超過(guò)14,000篇。

2b電轉儀不依賴(lài)于有絲分|裂,尤其適合不分化細胞,如靜止的T淋巴細胞、神經(jīng)細胞等,最快2小時(shí)可觀(guān)察到蛋白表達。相比脂質(zhì)體轉染、病毒轉導、傳統電穿孔儀,Lonza 2b電轉儀操作簡(jiǎn)單,重復性高,在原代細胞和細胞系中實(shí)現更高轉染效率、更高細胞活率、更快基因表達,加快推進(jìn)實(shí)驗進(jìn)程。

Fig. Primary NHDF-neo cells were transfected with labeled plasmid DNA encoding GFP, fixed after 2h in 3.5%PFA and analyzed by confocal microscopy.
Lonza Nucleofector核轉染技術(shù)依托電轉儀設備、電轉染試劑盒、全球共享數據庫三方面技術(shù)和資源優(yōu)勢,實(shí)現高效、靈活、方便的細胞轉染體驗。

①2b電轉儀——內置針對不同細胞類(lèi)型優(yōu)化的電脈沖程序,無(wú)需人工設置電壓電流等電擊參數,無(wú)需摸索轉染條件,選定程序一鍵操作,實(shí)驗過(guò)程簡(jiǎn)單方便。
②電轉染試劑盒——Lonza 2b電轉染試劑盒由電極杯(電轉杯)、電轉染緩沖液、補充劑、pmaxGFP陽(yáng)性對照質(zhì)粒、巴氏吸管組成。其電轉緩沖液配方根據原代細胞、細胞系類(lèi)型單獨優(yōu)化,每種試劑盒用于不同細胞類(lèi)型,以提高轉染效率、轉染后細胞活率,支持多種底物共轉染,實(shí)驗結果具備高重復性。
③全球共享數據庫——線(xiàn)上實(shí)時(shí)數據庫(https://knowledge.lonza.com),可查詢(xún)超過(guò)759種細胞的轉染全流程數據,包括轉染前細胞來(lái)源、傳代、培養條件、轉染程序選擇和操作技巧、轉染后培養條件、歷史轉染結果等,資源不斷更新,豐富便捷的數據參考,提高實(shí)驗效率,幫助科研人員專(zhuān)注于研究本身。
Lonza 2b細胞電轉儀轉染操作流程

Lonza 2b電轉儀參數
品牌 |
龍沙Lonza |
產(chǎn)地 |
德國科隆 |
中文名稱(chēng) |
Nucleofector 2b單孔細胞核轉染系統 |
英文名稱(chēng) |
Nucleofector II/2b Device |
型號 |
II/2b |
貨號 |
AAB-1001 |
分類(lèi) |
基因電穿孔轉染儀器 |
用途 |
懸浮細胞、貼壁細胞消化后轉染 |
通量 |
單個(gè)樣本 |
反應體系 |
100μL |
細胞數量 |
105至107 |
適用細胞 |
①動(dòng)物原代細胞、細胞系,物種包括各類(lèi)哺乳動(dòng)物、雞、斑馬魚(yú)、果蠅等 |
②原核微生物細菌 |
③外泌體等 |
轉染底物 |
DNA、RNA(mRNA、miRNA、siRNA等)、質(zhì)粒、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核蛋白復合體RNP、小分子化合物 |
尺寸 |
30×23×11cm |
重量 |
2.8kg |
電源 |
240V-110V,50-60Hz,自我調節 |
銷(xiāo)售授權 |
中國大陸一級代理商(不含港澳臺) |
貨期 |
大量現貨 |
服務(wù) |
售前技術(shù)咨詢(xún),裝機,售后服務(wù)(售后限北京澤平銷(xiāo)售儀器) |
引用文獻
1. Korbinian N. Kropp, et al.(2023) Targeting the melanoma-associated antigen CSPG4 with HLA-C*07:01-restricted T-cell receptors. https://doi.org/10.3389/fimmu.2023.1245559
2. Stephan Riesenberg, et al.(2023) Efficient high-precision homology-directed repair-dependent genome editing by HDRobust. https://doi.org/10.1038/s41592-023-01949-1
3. Kui Zhao, et al.(2023) Generation of an NSD2-deficient human embryonic stem cell line using CRISPR/Cas9 technology. https://doi.org/10.1016/j.scr.2023.103255
4. Meiling Jiang, et al.(2023) Generation of a homozygous RANGRF knockout hiPSC line by CRISPR/Cas9 system. https://doi.org/10.1016/j.scr.2023.103136
5. Xingjie Ren, et al.(2023) Efficient bi-allelic tagging in human induced pluripotent stem cells using CRISPR. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2023.102084
6. Ittetsu Nakajima, et al.(2023) In Vivo Delivery of Therapeutic Molecules by Transplantation of Genome-Edited Induced Pluripotent Stem Cells. https://doi.org/10.1177/09636897231173734
7. Shidong Qiu, et al.(2023) Generation of the induced pluripotent stem cell line SFMUi001-A from a patient with usher syndrome type 2 caused by biallelic variants in the USH2A gene. https://doi.org/10.1016/j.scr.2023.103101
8. Chiami Moyama, et al.(2023) Myb Repression Mediates Stat5b-knockdown-induced Apoptosis and Inhibits Proliferation of Glioblastoma Stem Cells. https://doi.org/10.21873/cgp.20374
9. Saito, M.K., et al.(2023) A disease-specific iPS cell resource for studying rare and intractable diseases. https://doi.org/10.1186/s41232-023-00294-2
10. Joseph T. Smith, et al.(2023) Developmental dynamics of mitochondrial mRNA abundance and editing reveal roles for temperature and the differentiation-repressive kinase RDK1 in cytochrome oxidase subunit II mRNA editing. https://doi.org/10.1128/mbio.01854-23
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