Lonza Nucleofector 384孔細胞核轉染系統
——實(shí)驗室高通量細胞電轉儀,高通量篩選工具
北京澤平代理的德國進(jìn)口龍沙Lonza 384孔細胞核轉染系統(Lonza 384-well Nucleofector System,原Amaxa HT Nucleofector System,簡(jiǎn)稱(chēng)Lonza 384孔電轉儀),是全球知名的Lonza Nucleofector電轉儀系列中的高通量電轉染設備,專(zhuān)業(yè)用于動(dòng)物細胞高通量電穿孔轉染,支持1分鐘內完成1-384個(gè)樣本獨立轉染,轉染細胞數量低至2E4,20μL轉染體系節省電轉試劑,廣泛用于CRISPR/Cas9基因編輯文庫篩選、RNAi、陣列cDNA、藥物靶點(diǎn)篩選等。

Lonza 384孔高通量電轉儀采用Lonza專(zhuān)利Nucleofector核轉染技術(shù),依據經(jīng)典電穿孔轉染原理,通過(guò)整合電穿孔儀器、細胞特異性電轉緩沖液(電轉液)、內置優(yōu)化的轉染程序,可將DNA、RNA、質(zhì)粒、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核蛋白復合體RNP、小分子化合物等導入細胞質(zhì),并跨過(guò)核膜直接進(jìn)入細胞核,因而Lonza電轉儀又稱(chēng)核轉儀。Nucleofector核轉染支持對原代細胞、干細胞、神經(jīng)元、難轉染細胞系的高效轉染,轉染后細胞活率高,實(shí)驗結果穩定,具備高重現性,質(zhì)粒轉染效率可高達90%,siRNA轉染效率可達99%。Nucleofector核轉染不依賴(lài)細胞有絲分|裂,表達迅速,轉染GFP質(zhì)粒最快2小時(shí)可觀(guān)察到蛋白表達。

Fig. Primary NHDF-neo cells were transfected with labeled plasmid DNA encoding GFP, fixed after 2h in 3.5%PFA and analyzed by confocal microscopy.
Lonza Nucleofector核轉染技術(shù)于2001年上市,20多年來(lái)全球發(fā)表文章超過(guò)36,000篇,廣泛應用于CAR-T、CAR-NK、CRISPR-Cas9基因編輯、干細胞、外泌體藥物遞送的前沿研究中,幫助快速推進(jìn)實(shí)驗室基礎研究和實(shí)現GMP級別商業(yè)化細胞產(chǎn)品生產(chǎn)。

Lonza 384孔核轉儀通過(guò)對電轉儀器、電轉緩沖液、電轉程序全方位優(yōu)化,實(shí)現高通量、高效細胞電轉染。

1、Lonza 384孔電轉儀——高通量轉染
Lonza 384孔電轉儀由電轉板處理單元、提供高壓脈沖的電源單元、基于PC的操作軟件組成。使用時(shí),電動(dòng)轉盤(pán)可放置2塊384孔板,將其中一塊板旋轉至板處理位置進(jìn)行電轉,每個(gè)孔可獨立運行不同轉染程序,1分鐘完成384個(gè)樣品的轉染,電轉后再旋轉回來(lái),按需進(jìn)行第二塊板的電轉,以方便地進(jìn)行快速、規;幚。

電轉儀軟件內置根據不同細胞類(lèi)型優(yōu)化的電轉程序,可使用PC方便地進(jìn)行選擇,無(wú)需設置電轉儀參數如電壓、電阻、電脈沖等,直接調用程序,操作簡(jiǎn)單。Lonza 384孔電轉儀與Lonza 4D電轉儀使用相同的電轉程序,384孔電轉儀摸索的轉染條件,可方便地在Lonza 4D電轉儀中線(xiàn)性放大轉染體積。
2、Lonza 384孔電轉試劑盒——提高轉染效率和細胞活率
Lonza 384孔電轉儀專(zhuān)用轉染試劑盒,由轉染試劑、補充劑、電擊耗材、陽(yáng)性對照質(zhì)粒等組成。
①電轉試劑——根據不同細胞單獨優(yōu)化轉染液和補充劑配方,以提高轉染效率和轉染后細胞活率,維護細胞正常生理功能。包含5種原代細胞轉染試劑(P1-P5)、3種細胞系轉染試劑(SE、SF、SG),適用于所有細胞類(lèi)型。同種細胞不同底物采用相同轉染試劑盒,可實(shí)現多種底物共轉染。

②電擊耗材——采用可導電的高分子聚合物電極,相比傳統鋁電極,非金屬電極避免了金屬離子造成的細胞毒害。384孔板每孔20μL體系,可轉染2*104-1*106個(gè)細胞,節省電轉試劑、細胞樣品。384孔板符合SBS標準,可無(wú)縫對接自動(dòng)液體處理系統,提高實(shí)驗效率。
3、Lonza全球共享轉染數據庫——豐富數據參考
免費在線(xiàn)數據庫(https://knowledge.lonza.com),提供超過(guò)759種細胞類(lèi)型的轉染程序,同時(shí)提供包括細胞來(lái)源、傳代、培養條件、轉染程序選擇和操作技巧、轉染后培養、歷史轉染結果等,數據持續更新,加之全球科研人員海量成功案例,提供了強有力的實(shí)驗參考和支持,使研究者可以專(zhuān)注于研究本身,快速推進(jìn)實(shí)驗進(jìn)程。

Lonza 384孔高通量電轉儀操作步驟圖解

Lonza 384孔高通量電轉儀參數
品牌 |
Lonza龍沙 |
產(chǎn)地 |
德國科隆 |
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中文名稱(chēng) |
384孔細胞核轉染系統 |
英文名稱(chēng) |
384-well Nucleofector System |
貨號 |
AAU-1001 |
用途 |
高通量轉染,作為CRISPR/Cas9基因編輯文庫、陣列cDNA、RNAi篩選工具 |
轉染底物 |
DNA、RNA、質(zhì)粒、多肽、蛋白質(zhì)、核糖核蛋白復合體RNP、小分子化合物 |
轉染細胞 |
動(dòng)物原代細胞、干細胞、細胞系,外泌體 |
轉染試劑盒類(lèi)型 |
P1~P5,SE、SF、SG,2款優(yōu)化試劑盒 |
電極材料 |
導電高分子聚合物 |
耗材 |
384孔板 |
 |
轉染細胞數量 |
2*104-1*106 |
使用方法 |
1min之內完成1~384個(gè)不同樣本轉染,可同時(shí)設置384種不同轉染程序 |
外觀(guān)尺寸 |
板處理單元:40cm*42cm*15cm |
電源單元:13.5cm*50cm*45cm |
重量 |
板處理單元:10kg |
電源單元:14kg |
操作系統 |
Windows 7、10 |
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